PBS緩沖液是什么?
緩沖液(Buffer solution)是一種可抵抗pH值變化的溶液,當(dāng)受到稀釋或向其中添加有限量的酸或堿時(shí),其pH變化不大。它通常由弱酸(Weak acid)與共軛堿(Conjugate base),或弱堿(Weak base)與共軛酸(Conjugate acid)組成。磷酸緩沖鹽溶液(Phosphate Buffered Saline, PBS)是一種生物學(xué)研究中常用的緩沖液,可維持一個(gè)穩(wěn)定的pH環(huán)境。PBS緩沖液由水、氯化鈉、氯化鉀、弱酸KH2PO4和共軛堿Na2HPO4配制而成,通常將pH調(diào)至pH7.4。人體的pH值介于7.35至7.45之間,平均值為7.40。PBS緩沖液還模擬了人體滲透壓和離子濃度。由于它對(duì)細(xì)胞無毒,因此被廣泛用于洗滌細(xì)胞、組織運(yùn)輸和稀釋。尤其在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,常用于胰酶消化細(xì)胞前的細(xì)胞洗滌,徹底去除血清。
緩沖液顧名思義是起到緩沖作用的液體,向緩沖液中加入少量的酸性溶液,或者堿性溶液時(shí)保證溶液本身不會(huì)發(fā)生太大的PH值的變化,一般在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多,有時(shí)候也會(huì)用于保存生物某個(gè)部分。那么pbs緩沖液有什么特點(diǎn),有什么作用呢?
pbs全稱是磷酸緩沖鹽溶液,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。主要成分是Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,它是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液。
緩沖液起作用的原理主要在磷酸一氫根離子,磷酸二氫根離子的電離,這兩種離子既能水解也能電離,水解時(shí)與水分子中的一個(gè)氫離子結(jié)合,水分子中的氫氧根離子多余使溶液顯弱堿性,電離時(shí)離子的氫離子被電離出來使溶液顯弱堿性。當(dāng)向緩沖液中加入少量酸溶液,電離大于水解,保持溶液PH值穩(wěn)定,當(dāng)向緩沖液中加入少量堿溶液,水解大于電離,保持溶液PH值穩(wěn)定。
由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣,所以pbs緩沖液的應(yīng)用比別的溶液次數(shù)多范圍廣。這也是pbs緩沖液最明顯的特點(diǎn)。一般的生理鹽水呈中性,不能調(diào)整保證PH值的穩(wěn)定不變,活性物質(zhì)不能保證其在最適PH值條件下參與反應(yīng),而蒸餾水不具有鹽平衡能力,這會(huì)使得生物蛋白被破壞,所以既能平衡PH值,又能保持鹽平衡,特點(diǎn)明顯,作用強(qiáng)大,使用pbs緩沖液是首選。
pbs緩沖液的主要成分很簡(jiǎn)單,配置方法也很簡(jiǎn)單,1L的pbs緩沖液需要0.27g的磷酸二氫鉀(KH2PO4),1.42g的磷酸氫二鈉(Na2HPO4),8g的氯化鈉(NaCl),0.2g的氯化鉀(KCl),加入蒸餾水充分?jǐn)嚢枞芙?,最后定容?L便可以了。